La technique du patch clamp |
On pose la
micropipette sur la membrane de l'axone (ou du neurone) et on aspire doucement la
membrane. On retire ensuite la micropipette à la pointe de laquelle reste rattaché un
lambeau de membrane. On plonge la micropipette dans une solution de composition ionique
voisine de celle du cytoplasme, la face cytoplasmique de la membrane se trouvant au
contact de la solution. La pipette elle-même est remplie d'une solution de composition
ionique analogue à celle du milieu extracellulaire. On branche un circuit électronique
entre le liquide de la pipette et le liquide mimant le cytoplasme. Ce circuit maintient la
tension entre les deux faces de la membrane à une valeur constante, choisie par
l'expérimentateur (tension imposée). Ce circuit permet aussi de mesurer le courant
ionique qui traverse la membrane. Cela permet de tester si le, ou les canaux ioniques
portés par le lambeau de membrane sont ouverts ou fermés.
Le nombre de canaux ioniques portés par le lambeau de membrane dépend de
sa taille. Les canaux ioniques sont piégés au hasard, les expériences permettront de
déterminer leur spécificité.
Canaux ioniques à Na+
Canaux ioniques à K+
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Rédigé par : Jean-François Madre (jean-francois.madre@wanadoo.fr)